檢測蛋白質(zhì)的材料原則(蛋白質(zhì)的檢測選材)
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檢測蛋白質(zhì)的理想材料
1、鑒定蛋白質(zhì)的常用化學試劑是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g·ml^-1的naoh溶液(雙縮脲試劑a液)和質(zhì)量濃度為0.01g·ml^-1的cuso4溶液(雙縮脲試劑b液)。
2、是的。雞蛋清里蛋白質(zhì)含量高,可以做為蛋白質(zhì)鑒定的理想材料,只是雞蛋清應稀釋一下避免粘在試管壁上難清洗。而且雞蛋清呈透明,加入雙縮脲試劑后,比較容易看出其顯色反應。如果選植物的話,可以用黃豆。
3、步驟 首先,我們要選擇實驗材料,最好選擇高蛋白的食物漿液,這樣會比較方便進行蛋白質(zhì)的檢測,比如豆?jié){和蛋清就是很好的選擇。接著,就要準備雙縮脲試劑,雙縮脲試劑分為A液:氫氧化鈉的質(zhì)量分數(shù)為0.1g/mL的水溶液。
4、雙縮脲反應實質(zhì)是在堿性環(huán)境下的Cu2+與雙縮脲發(fā)生的紫色反應。而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應,可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。
5、由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。用于鑒定還原糖的實驗材料準備植物組織是常用的實驗材料,但必須加以選擇。
蛋白質(zhì)檢測方法
1、全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,即為滴定終點,結算出蛋白質(zhì)含量。雙縮脲法:是一種用于鑒定蛋白質(zhì)的分析方法。
2、蛋白質(zhì)檢測方法有凱氏定氮法、雙縮脲法、考馬斯亮藍法等。凱氏定氮法 是一種測定總氮含量的方法,可以在混合物或化合物中檢測。
3、蛋白質(zhì)的檢驗方法有:蛋白質(zhì)的鹽析取5mL蛋白質(zhì)溶液,加入等體積飽和硫酸銨溶液(濃度為50%飽和)。
4、測定蛋白質(zhì)的方法可分為兩大類:一類是利用蛋白質(zhì)的共性,即含氮量、肽鍵和折射率測定蛋白質(zhì)含量;另一類是利用蛋白質(zhì)中特定氨基酸殘基、酸性和堿性基團以及芳香基團等測定蛋白質(zhì)含量。
5、一般用雙縮脲試劑鑒定,雙縮脲試劑可以和蛋白質(zhì)發(fā)生紫色反應。
6、方法有以下幾種:直接測定UV法。凱氏定氮法。雙縮脲法。酚試劑法。紫外吸收法。BCA法。Lowry法。考馬斯亮藍法。Bradford法測定試劑盒。
檢測生物組織中的糖類,脂肪,蛋白質(zhì)應注意哪些事項
1、第一注意雙縮脲試劑與斐林試劑二者中硫酸銅溶液濃度不同。第二:這兩種試劑使用方法。
2、太多了,如糖類,應含還原糖,無色(或近白色),可溶,斐林試劑現(xiàn)配現(xiàn)用,水浴加熱。脂肪,易切薄片,手易捏拿,染色時注意洗浮色。蛋白質(zhì),含量高,有的要稀釋,雙縮脲試劑正確使用等。
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4、檢測還原糖時注意事項:①所取材料要白色或近白色。②斐林試劑使用時氫氧化鈉和硫酸銅溶液要先混合再用,現(xiàn)配先用。③加熱時要注意水浴加熱。
5、脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,可以產(chǎn)生紫色反應。淀粉遇碘變藍色。因此,可以根據(jù)與某些化學試劑所產(chǎn)生的顏色反應,檢測生物組織中糖類、脂肪或蛋白質(zhì)的存在。
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